一、全視野細胞掃描分析儀的原理介紹：
（1）Celigo Image Cytometer是一款新科技的細胞全孔高速掃描成像分析儀。

（2）Celigo 細胞成像分析儀可分析生長在微孔板和 T‐flask 中的貼壁和非貼壁（懸浮）細胞，具有超越傳統方法的更好的優勢。

（3）具有一致的，高質量，全孔的明亮視野（brightfield）成像功能，結合強大的分割軟件可在 5 分鐘內獲得整個微孔板的所有孔中的所有細胞的高質量數據。Celigo 具有非破壞性和非侵入性明亮視野分析功能，并有多色熒光功能作補充，使系統適合任何基于細胞的廣泛的實驗。

（4）其分辨率足夠高，達到1um成像精度，相當于顯微鏡15X放大倍數，對于處理單個細胞的信號識別是足夠清晰完整的。

二、全視野細胞掃描分析儀的斑馬魚（北京）科技有限公司，是PerkinElme珀金埃爾默的經銷商，負責產品的推廣銷售和技術支持，為您提供儀器的參數、價格、選型、技術原理等信息，更多信息可咨詢。

Celigo的典型圖像如下：

三、其次，在這種成像精度下，如何實現對1536孔，384孔，96孔，24孔，甚至6孔板的全孔成像呢？這涉及到其采用的一個光學技術，應用一個大型的F-theta透鏡和電磁檢流計鏡片來對全孔進行大面積快速掃描。其技術原理圖如右。在該技術下，透鏡的位移*由電磁推動，安靜快速而*沒有機械位移，其精度可小于1um，從而保證了后續的多圖像拼接保持了一致性。

這就帶來了細胞大規模圖像分析的幾個好處：

☆ 原位in situ
在細胞生長的過程中無需消化細胞，無需取樣，無需進行任何處理，可在任何時間點隨時成像，隨時分析，隨時獲得統計學數據處理結果。

☆ 全孔 full well
如6孔板一個孔的完整細胞圖像，由256張細胞圖像拼接而成；96孔板一個孔的完整細胞圖像，由16張細胞圖像拼接而成。由于每個孔均是高清晰度的全孔細胞分析，從而保證了統計學意義的一致性。（孔與孔之間由于細胞加樣量的差異，細胞生長的差異，懸浮沉降細胞移動導致的固定小視野不能準確追蹤等問題均得到解決。）

☆ 全孔照明亮度的均一。這是由于掃描光路的特性帶來的。圖像見下：

☆ 快速。這是系統的掃描光路電磁透鏡技術帶來的。其處理全孔高精度圖像分析下的處理速度如下：

☆ 整板whole plate
整板的全孔圖像預覽和曲線分析帶來一目了然的細胞分析結果，而這一切均在<10min的速度下完成，從而簡單實現多時間點的整板細胞生長分析快速追蹤。
適用于各種規格細胞培養板（6/12/24/96/384/1536孔板）和培養瓶(T-25&T-75)。

☆ 多通道multi channels
共有四個通道，采用四個獨立的LED光源，包括一個高質量的明場通道，和三個熒光通道。標配：
- 藍色熒光：ex/em377/477(e.g., Hoechst, DAPI)
- 綠色熒光：ex/em483/536(e.g., FITC, Calcein, Alexa Fluor 488, GFP)
- 紅色熒光：ex/em531/629 (e.g., PI, Texas Red, Alexa Fluor 568)
選配：可替換以上三個熒光的任一通道
- Far-Red (e.g. Alexa Fluor 647, DRAQ5)

Celigo能做什么？
Celigo是一款基于多熒光通道細胞成像的快速全孔&整板掃描分析儀，因此基于細胞成像的關于全孔的細胞生長監測和全孔的細胞熒光功能檢測的應用，都可以選擇Celigo。

☆ 基于高質量明場的細胞生長分析 Label-free assays

靈活的分析軟件設計可以通過兩種分析方法獲取細胞增殖曲線。

☆ 基于熒光通道的細胞功能分析Fluorescence assays

應用舉例：

細胞活性（毒性）分析 Cell Viability(Toxicity)
通過Calcein AM/PI/Hoechst33342三種熒光染料分別標記活/死/全部細胞。通過Celigo可輕松獲取全孔&整板細胞圖像和自動報告活死細胞百分比，以及不同組別的對照數據。

細胞增殖(DNA合成)Cell Proliferation(DNA Synthesis)
細胞圖像數據
A．96孔板全孔A549細胞圖像（BrdU-綠色，DAPI-藍色）；B．局部放大全孔細胞圖像（DAPI-所有細胞，BrdU-S期細胞）

設門數據

克隆形成Colony Formation

細胞遷移（損傷修復）Cell Migration(Wound Healing)
使用Oris Platypus專用損傷修復板，通過Celigo自動分析明場&熒光通道細胞數量或細胞融合度，獲得損傷修復/遷移的細胞增殖情況。

熒光蛋白表達Fluorescence Proteins
96孔板中掃描全孔Hela細胞轉染后GFP/RFP表達的情況。

瞬時轉染不同濃度的編碼turbo-GFP的質粒到Hela細胞，轉染后多個時間點分析96孔板中GFP陽性表達率，GFP陽性細胞數，以及死細胞（PI標記）的百分比。

3D腫瘤球分析3D Tumor Speroid

17-AAG和PI-103濃度依賴性的腫瘤球生長抑制。

（a) 細胞接種、加藥、Celigo成像和分析流程圖；(b-g) 不同藥物濃度對腫瘤球生長的抑制情況。

細胞重編程iPSC Reprogramming

小鼠胚胎成纖維細胞通過Yamanaka方法誘導生成iPSC，通過Celigo掃描6孔板檢測和分析iPSC克隆形成情況。
Data courtesy of Kaji Lab, MRC Centre for Regenerative Medicine, University of Edinburgh

干細胞多能性鑒定Stem Cell Pluripotency

誘導后的多能干細胞通過Celigo檢測特異性多能干細胞的標記（OCT4，SSEA4）。